準(zhǔn)備工作
一、制定培養(yǎng)方案
當(dāng)我們準(zhǔn)備培養(yǎng)一個(gè)菌株之前,首先要了解這個(gè)菌株的生長(zhǎng)特性,確定該菌株的營(yíng)養(yǎng)需求、生長(zhǎng)溫度、氣體環(huán)境、滲透壓、酸堿度及嗜鹽性等條件,選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)環(huán)境,制定活化培養(yǎng)方案。通常購(gòu)買的菌株都附帶說(shuō)明書,按照說(shuō)明書推薦的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件來(lái)準(zhǔn)備。若沒有說(shuō)明書,可通過(guò)查閱文獻(xiàn)(推薦查看伯杰細(xì)菌手冊(cè)或常見細(xì)菌鑒定手冊(cè))等方式確認(rèn)菌株的生長(zhǎng)條件,再制定方案。
二、菌株處理
獲得菌株后,原則上應(yīng)盡早進(jìn)行活化和保存。若不能立即活化,應(yīng)按照說(shuō)明書放入相應(yīng)的環(huán)境中進(jìn)行保存。若菌株為厭氧菌,請(qǐng)按厭氧菌培養(yǎng)要求在厭氧環(huán)境中操作。
(1)若保存的菌株為凍干粉形式,可加入少量生理鹽水或非選擇性肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行溶解懸浮,用劃線或涂布方式接種至平板,或著吸取菌液至液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。
(2)若保存的菌株為甘油凍存或液體保存形式,可在室溫速融后劃線或涂布接種至平板,或直接加入到液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。
(4)若保存的菌株為斜面或半固體形式,可直接挑取菌苔轉(zhuǎn)接至平板或液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。
三、活化菌株使用的培養(yǎng)基的成分通常包括以下幾個(gè)組分:
(1)基本營(yíng)養(yǎng)成分,如蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉等,主要提供碳源、氮源及微量元素等;
(2)氯化鈉:維持一定的滲透壓環(huán)境;
(3)磷酸鹽:維持pH的相對(duì)穩(wěn)定;
(4)特殊成分:如血清、半胱氨酸、氯化血紅素等,促進(jìn)特定菌的生長(zhǎng)。
根據(jù)菌株的生長(zhǎng)特性,選擇合適的培養(yǎng)基或?qū)μ囟ǖ呐囵B(yǎng)基添加成分進(jìn)行改良,以滿足菌株的生長(zhǎng)需求