| 產(chǎn)品名稱 |
NCTC clone 929(L929) |
| 商品貨號 |
MZ-0409 |
| 中文名稱 |
小鼠成纖維細胞 |
| 細胞數(shù)量 |
1*10^6 |
| 組織來源 |
皮下結(jié)締組織；疏松結(jié)締組織及脂肪 品系：C3H/An |
| 細胞形態(tài) |
成纖維細胞，貼壁生長 |
| 細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 培養(yǎng)基 |
MEM培養(yǎng)基；馬血清10%；雙抗，1%。該細胞不能用胎牛血清培養(yǎng)。 |
| 傳代方法 |
1:2 |
| 細胞描述 |
1948年三月建立了NCTC clone 929(小鼠結(jié)締組織)，細胞系L的克隆。細胞系L是最早建立的連續(xù)培養(yǎng)細胞系之一，而clone 929是最早的克隆株。從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的正常皮下疏松結(jié)締組織入脂肪組織中建立了親本細胞系L。 第95代的細胞系L使用毛細管法分離單細胞建立了clone929。檢測發(fā)現(xiàn)鼠痘病毒陰性。 |
| 培養(yǎng)條件 |
Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃ |
| 細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 |
| 細胞運輸 |
干冰運輸(2ml凍存管)或活細胞運輸（T25細胞瓶） |
