培養(yǎng)基說明 |
人胚胎干細胞和誘導多能干細胞具有分化成外胚層所有細胞的能力,包括神經干細胞。人多能干細胞分化的神經干細胞被用與研究神經系統(tǒng)發(fā)展,神經系統(tǒng)疾病建模,神經毒理學和藥物篩選。 SMAD信號在神經誘導起關鍵作用。SMAD信號的雙重影響,Noggin和SB431542充分的誘導hPSC完全、快速的轉變?yōu)樯窠浖毎1].2010年李文林和他的同事發(fā)現(xiàn)glycogen synthase kinase 3 (GSK3) 和 transforming growth factor (TGF-β)的協(xié)同抑制作用,可有效地使hPSC在7天內轉化為同質神經上皮。[2].分化的神經干細胞可以在人白血病抑制因子、GSK3和TGF-β的作用下實現(xiàn)自我更新。神經干細胞有分化為多種神經細胞和神經膠質亞形的能力,通過特殊的誘導。 基于先進的神經細胞分化理論,我們開發(fā)了多能干細胞誘導神經干細胞培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基為無血清培養(yǎng)基,在貼壁培養(yǎng)條件下可以高效的使hPSCs轉化為NSCs。hPSCs在神經誘導培養(yǎng)基下可以轉化為同源神經上皮。用PSCNIM處理7~10天,90%以上的細胞表達神經干細胞標記物質:Nestin 和Sox2;同時多能干細胞標志物Nanog的表達消失。來源于hPSC的NSCs可以在誘導培養(yǎng)基里培養(yǎng)至少5段(大概24天),能明顯形成花環(huán)狀,并在含有EGF和FGF的培養(yǎng)基擴展為神經前體細胞,或誘導分化為神經細胞血統(tǒng)的神經元和星形膠質細胞。 |