| 產(chǎn)品名稱 |
小鼠原代骨骼肌細(xì)胞 |
| 商品貨號(hào) |
MZ-514 |
| 組織來(lái)源 |
昆明、C57小鼠（出生1-3天）3-5只 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
| 細(xì)胞形態(tài) |
成纖維細(xì)胞樣 |
| 培養(yǎng)基 |
建議購(gòu)買(mǎi)原代配套完培 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。 |
| 細(xì)胞描述 |
骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞是位于基膜與肌膜之間未分化的細(xì)胞，一般情況下處于靜止?fàn)顟B(tài)，當(dāng)肌細(xì)胞受到損傷刺激時(shí)，衛(wèi)星細(xì)胞被激活，更新，增殖，分化并與原有的骨骼肌細(xì)胞相互融合，形成新的肌纖維細(xì)胞。 肌組織作為人體的最大組織，同其它組織相比來(lái)源更豐富。大量研究證實(shí)衛(wèi)星細(xì)胞對(duì)骨骼肌受創(chuàng)傷后肌纖維的再生和修復(fù)起著重要作用。細(xì)胞鑒定肌動(dòng)蛋白（α-actin）免疫熒光染色為陽(yáng)性 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 主要功能 |
（1） 骨骼肌受損時(shí)，靜止的、被稱為衛(wèi)星細(xì)胞的成肌細(xì)胞被激活增殖、遷移、最終 分化。 （2） 多種的細(xì)胞信號(hào)途徑，包括磷脂酰肌醇（-3）激酶、鈣神經(jīng)素、JAK2/STAT3 和有絲分裂原活化蛋白激酶，參與骨骼肌的生長(zhǎng)。 |
| 主要病生理變化 |
（1） 骨骼肌萎縮。 （2） 骨骼肌拉傷。 （3） 骨骼肌壞死。 |
